Otras ventajas de este método de genotipado son:
- El bajo coste de los análisis.
- Su alto rendimiento.
- Permite trabajar directamente a partir de lisados celulares crudos, sin necesidad de purificar el ADN.
- No requiere clonar los productos de PCR.
- Permite el cálculo del número de nucleótidos insertados o eliminados, con la consiguiente identificación de mutaciones con desplazamiento del marco de lectura que impiden la expresión del gen diana.
- Es capaz de detectar inserciones o deleciones de un único nucleótido.
- Se puede trabajar en multiplex, utilizando distintas parejas de cebadores, para el estudio simultáneo de varias regiones del ADN.
La electroforesis capilar de los fragmentos de ADN se realiza en el analizador genético modelo 3500 de Applied Biosystems de reciente adquisición: https://www.um.es/documents/1765772/3473787/AnalizadorGenetico3500-En19v3.pdf/b729d709-edef-426a-a765-f2ae4d3da882
Para la puesta a punto de este método de genotipado, la Plataforma de Biología Molecular del Área Científica y Técnica de la Universidad de Murcia (ACTI)-IMIB ha colaborado activamente con el grupo de investigación de "Fisiología reproductiva y reproducción asistida" del propio IMIB, que ya lo está utilizando para la identificación de mutantes generados por el sistema CRISPR/Cas9 en el desarrollo de modelos porcinos de enfermedades humanas.
Fig. 1: dato bruto de un análisis de fragmentos de ADN en multiplex mediante electroforesis capilar.
Fig. 2: analizador genético modelo 3500 de Applied Biosystems instalado en SBM-ACTI-IMIB.
